ارزیابی مقاومت آنتی بیوتیکی به کاپرئومایسین با استفاده از روش هایMultiplex PCR و Real-Time PCR

مقدمه و هدف: کاپرومایسین، یک داروی مهم برای درمان سل مقاوم به چند دارو و یک آنتی بیوتیک پپتیدی ماکروسیکلیک است که توسط Saccharothrix mutabolis زیر گونه capreolus تولید می شود. هدف از این مطالعه ارزیابی مقاومت آنتی بیوتیکی به کاپرئومایسین با استفاده از روش هایMultiplex PCR و Real-Time PCR می باشد. مواد و روش کار: اساس مقاومت به این دارو با جداسازی و شناسایی سویه‌های مقاوم به کاپرومایسین در مایکوباکتریوم توبرکلوزیس و یک مایکوباکتریوم غیرسلی بررسی شد. اطلاعات لازم در مورد مقاوم به کاپرومایسین از یک کتابخانه ژنی مربوط به مایکوباکتریوم غیرسلی که در این مطالعه M. smegmatis می باشد بازیابی شدند. همچنین محل ایجاد ترانسپوزون جهش یافته در ژنtlyA (Rv1694) مربوط به ژنوم M. tuberculosis H37Rv بررسی و انتخاب شد. DNA های ژنومی از منابع جهش یافته ترانسپوزون M. tuberculosis H37Rv با استفاده از پرایمرهای ژن tlyA و ترانسپوزون برای شناسایی جهش‌ها در ژن های tlyA توسط Multiplex PCR و Real-Time PCR غربالگری شدند. نتایج: یک جهش مقاوم به کاپرومایسین که حاوی ژن tlyA بود، شناسایی شد. ژن tlyA نوع وحشی حساسیت به کاپرومایسین را در جهش‌های ترانسپوزون M. smegmatis و M. tuberculosis ترمیم کرد. در ژن tlyA ، 28 جهش خودبه‌خود مقاوم به کاپرومایسین تولید شده از سه سویه مختلف M. tuberculosis و جدایه‌های بالینی مقاوم به کاپرومایسین یافت شد. نتیجه گیری: با توجه به نتایج بدست آمده، به نظر می رسد tlyA بر ریبوزوم تأثیر می گذارد، و جهش tlyA باعث ایجاد مقاومت به کاپرومایسین می شود.